一种牛精子膜蛋白的纯化及在生殖中的作用

摘要

牛精子经 φ =0 .5%的NP 4 0洗脱后 ,先经伴刀豆凝集素ConA(ConcanavalinA)亲和层析分离 ,经SDS PAGE电泳 ,得到相对分子质量Mr 分别为 32× 10 3,2 6× 10 3,2 0× 10 3的 3种与ConA结合的糖蛋白CBG(ConAbindingglycoprotein) .再将亲和层析分离所得蛋白成分经葡聚糖凝胶 (SephadexG 10 0 )层析柱进一步纯化 ,得到Mr 为 2 6× 10 3的单一成分 .将 2 6× 10 3CBG免疫兔后制得抗血清 ,经PAP免疫组织化学染色发现 :2 6× 10 3的CBG抗原主要分布于牛精子的顶体区 ,同时鼠精子表面也有同样分布 ,说明 2 6× 10 3的CBG抗原具有种间保守性 .后将 2 6× 10 3的CBG免疫雌鼠 ,发现其产仔率由对照组的 (8.5± 2 .6 )只 (n =12 )减少到 (4 .3± 1.8)只 (n =2 4 ) ,经t检验 (不配对 ,单尾 ) ,二者间差异极显著 (p <0 .0 0 1) .本实验结果表明 :2 6× 10 3的CBG在精卵结合中可能发挥重要作用 ,并有可能开发为人工避孕疫苗 .