绵羊粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子基因(GM-CSF)Real-time PCR方法建立及其在脂多糖诱导肺泡巨噬细胞中的动态表达

摘要

建立了绵羊(Ovis aries)粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子基因(GM-CSF)的EvaGreen Real-time PCR方法,具有较高的灵敏性(检测精度在10个拷贝数以内)和特异性(溶解曲线仅出现一个产物峰).绵羊GM-CSF在脂多糖(LPS)诱导前不表达,在诱导4 h后逐渐增加,在8 h达到最高(470 930拷贝数/ng总RNA),在诱导16 h之后表达水平逐渐降低.表明Real-timePCR是一种灵敏、可靠的检测绵羊GM-CSF表达的方法,GM-CSF参与早期的免疫应答反应.