RhoA/ROCK-NFκB信号传导通路在内脂素引起心肌细胞肥大中的作用

摘要

目的探讨RhoA/ROCK2和NFκb信号传导通路在内脂素引起的心肌细胞肥大中的作用。方法购买出生2~3 d的SD乳鼠,利用差速贴壁法提取原代心肌细胞并进行培养。培养48 h后换为无血清的培养基继续培养24 h,之后48 h改为无血清的培养基继续培养24 h后,根据实验设计分为不同的干预组。应用Real time-PCR、Western-Blot技术检测不同分组心肌细胞中BNPmRNA及蛋白表达情况,免疫细胞化学法观察NFκB核转位情况。ipp软件计算心肌细胞表面积,Western-Blot技术检测RhoA、ROCK2和IκB-α蛋白表达情况。结果与正常对照组比较,10 ng/ml,50 ng/ml和100 ng/ml内脂素预处理24 h的心肌细胞中,RhoA,ROCK2蛋白表达升高,IκB-α蛋白表达降低(P<0.05,P<0.01)。与正常对照组比较,100 ng/ml内脂素预处理24、48、72 h的心肌细胞中,RhoA ROCK2蛋白表达升高,IκB-α表达降低(P<0.05,P<0.01)。SN50+内脂素、辛伐他汀+内脂素、Y27632+内脂素预处理48 h的心肌细胞表面积,与内脂素干预比较降低(P<0.05,P<0.01),与正常对照组比较升高(P<0.05,P<0.01)。SN50+内脂素、辛伐他汀+内脂素、Y27632+内脂素预处理48h的心肌细胞BNP mRNA和蛋白表达,与内脂素干预比较降低(P<0.05,P<0.01),与正常对照组比较升高(P<0.05,P<0.01)。与正常对照组比较,辛伐他汀、Y27632、SN50予干预组心肌细胞中ROCK2和IκB-α蛋白表达比较差异有统计学意义(P<0.01)。结论内脂素可以通过RhoA/ROCK-NFκB信号传导通路引起心肌细胞肥大。