甘薯IbGL3的克隆和表达分析

摘要

紫色甘薯富含花青素,具有较高的食用和药用价值.花青素的生物合成受到结构基因和调节基因的控制.bHLH(basic helix?loop?helix protein)转录因子能够调节多个花青素结构基因的表达,在花青素生物合成途径中具有重要的调控作用,但目前在甘薯中还没有关于bHLH调控花青素生物合成的相关报道.为进一步了解IbGL3基因在甘薯花青素生物合成的功能和作用机理,该研究根据甘薯转录组数据,利用RT?PCR技术在甘薯中克隆了一个2120 bp的bHLH基因IbGL3,该基因包含一个1878 bp的开放阅读框,编码625个氨基酸,蛋白质分子量69.08 kD,理论等电点(pI)5.20.IbGL3蛋白和其他植物中类黄酮合成相关的bHLH蛋白具有较高的同源性,都包含保守的MIR区、bHLH结构域和ACT类似结构域.系统发育进化树分析结果显示,IbGL3与其他植物类黄酮相关bHLH蛋白聚为一类,属于Ⅲf亚类成员.表达结果显示,IbGL3基因在紫色甘薯中的表达量最高,在浅紫色甘薯中的表达量次之,在白色甘薯中表达量最低,与花青素积累正相关,因此推测其在甘薯花青素生物合成途径中具有重要的调控作用.