HPLC-MS/MS法测定血液病患者血浆中伊布替尼血药浓度的方法学研究及临床应用

摘要

目的:建立测定血液病患者血浆中伊布替尼血药浓度的HPLC-MS/MS法,并将其应用于临床治疗药物监测。方法:以伊布替尼-d 5为内标,血浆样本经含内标的甲醇沉淀蛋白处理。HPLC色谱柱为Ultimate XB-C18(50 mm×4.6 mm,5μm),柱温60°C,流动相为含0.1%甲酸+2 mmol/L乙酸铵的水溶液与含0.1%甲酸的甲醇溶液,流速0.8 ml/min,梯度洗脱。质谱检测方式为电喷雾正离子(ESI+)模式,多离子反应监测(MRM)扫描,同时监测伊布替尼m/z 441.3~138.1(定量离子),伊布替尼m/z 441.2~304.1(定性离子);伊布替尼-d 5 m/z 446.2~138.1。以伊布替尼和伊布替尼-d 5峰面积比为定量依据,计算血浆中伊布替尼浓度,并对其性能进行考察。结果:伊布替尼在10~2000 ng/ml范围内线性较好(r^(2)=0.9997),最低检测限为1.65 ng/ml;批间、批内RSD均小于10%;回收率为101.31%~102.54%。5例临床血液病患者伊布替尼血药浓度检测结果范围为3.07~254 ng/ml,在1.65~2000 ng/ml之间。结论:本方法可简便、准确、快速地检测伊布替尼浓度,适用于伊布替尼血药浓度的日常监测。