罗汉果皂苷Ⅵ对LPS诱发肝细胞损伤的保护作用及机制研究

摘要

目的:探讨罗汉果皂苷Ⅵ(MⅥ)对脂多糖(LPS)致体外肝细胞损伤的保护作用及其机制。方法:构建LPS诱导的L02细胞损伤模型,采用不同浓度(7.5、15、30μmol/L)MⅥ或30μmol/L MⅥ联合4 mmol/L PGC-1α抑制剂SR-18292处理24 h,MTT检测细胞增殖活性;比色法检测细胞培养上清中丙氨酸氨基转移酶(ALT)和天冬氨酸氨基转移酶(AST)水平,以及细胞中超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性和丙二醛(MDA)含量;流式细胞术检测细胞凋亡率;Mito-Tracker Green染色法观察细胞线粒体分裂;qRT-PCR检测线粒体DNA(mtDNA)的拷贝数;qRT-PCR和Western blotting检测细胞中PGC-1α、NRF-1、TFAM的表达水平。结果:与对照组比较,LPS组L02细胞增殖活性及胞内GSH-Px和SOD活性均明显降低(P<0.05);细胞凋亡率,上清液中ALT、AST水平及胞内MDA含量均明显升高(P<0.05);线粒体分裂水平、mtDNA拷贝数及PGC-1α、NRF-1、TFAM的mRNA和蛋白表达水平均明显降低(P<0.05)。与LPS组比较,不同剂量MⅥ处理后,细胞增殖活性及胞内GSHPx和SOD活性均明显升高(P<0.05);细胞凋亡率,上清液中ALT、AST水平及胞内MDA含量均明显降低(P<0.05);线粒体分裂水平、mtDNA拷贝数及PGC-1α、NRF-1、TFAM的mRNA和蛋白表达水平均明显升高(P<0.05)。然而,SR-18292处理可明显抑制MⅥ对细胞损伤的改善效果。结论:MⅥ能有效改善LPS致体外肝细胞损伤,其潜在的分子机制可能是通过增强PGC-1α/NRF-1/TFAM信号通路,进而促进肝细胞线粒体生物合成,降低细胞内氧化应激水平,抑制细胞凋亡。