利用miRNA芯片分析酒精刺激肝癌细胞株miRNA表达谱的差异

摘要

目的:检测酒精刺激对肝癌细胞miRNA表达谱差异,探讨异常表达的miRNA与酒精刺激诱导肝癌细胞生长转移的分子机制.方法:0.2%酒精刺激细胞培养,提取总RNA,在miRNA微阵列芯片中杂交检测,通过芯片扫描和数据分析,获得miRNAs表达谱,筛选出表达差异明显者进行RT-PCR验证;Western blot检测TET蛋白的表达.结果:0.2%酒精处理肝癌细胞24h后出现多个miRNAs的差异表达,其中miRNA-29家族上升较为明显,RT-PCR验证得到与芯片相一致的结果,Western blot检测结果显示TET3蛋白表达下降.结论:酒精刺激可以导致肝癌细胞miRNAs表达谱出现多种差异性改变,这些改变可能会导致相关蛋白表达的改变从而影响肝癌的发生发展.