佛波酯对SMMC-7721人肝癌细胞粘附及整合蛋白基因表达的调控作用

摘要

用促癌剂佛波酯（ＰＭＡ）作用于ＳＭＭＣ－７７２１人肝癌细胞，研究细胞表面的主要粘附分子α５β１整合蛋白基因表达及相应细胞粘附行为的改变．用１００ｎｍｏｌ／ＬＰＭＡ作用ＳＭＭＣ－７７２１人肝癌细胞，发现其作用因时间的长短而异，作用３０、６０、１２０ｍｉｎ分别增加细胞与纤连蛋白（Ｆｎ）粘附１８．８％、３８．７％和５６．６％，作用６、１２ｈ分别降低４４．０％、３７．４％，而不影响与多聚赖氨酸的粘附．使用足量的抗α５和／或抗β１单抗预先封闭细胞与Ｆｎ的结合点，再将细胞与Ｆｎ粘附，发现α５单抗单独使用可将ＳＭＭＣ－７７２１细胞与Ｆｎ的粘附抑制２０％左右，β１单抗则抑制１４％，两者联合使用时可封闭４０％左右的粘附，提示该细胞表面存在除α５β１外的其它整合蛋白在介导着细胞与Ｆｎ的粘附．进一步应用Ｎｏｒｔｈｅｒｎｂｌｏｔ方法，分析整合蛋白基因表达，发现１００ｎｍｏｌ／ＬＰＭＡ抑制α５亚基转录，以３０ｍｉｎ最明显，抑制达８３．１％，作用６、１２ｈ抑制率仍为４６．６％、４３．６％．还就ＰＭＡ影响细胞粘附和整合蛋白基因表达的可能机理作了讨论．