黄花蒿培养细胞中青蒿素合成代谢的体外调节

摘要

黄花蒿培养细胞通过两步培养积累青蒿素．第１步在含有０．２～０．４ｍｇ／Ｌ６－苄基氨基嘌呤（６－ＢＡ）和３～４ｍｇ／Ｌ吲哚乙酸（ＩＡＡ）的Ｎ６培养基中进行细胞的增殖培养，第２步将培养好的细胞转入含０．２～０．４ｍｇ／Ｌ６－ＢＡ和０．２～０．４ｍｇ／ＬＩＡＡ的改良Ｎ６培养基中进行青蒿素的合成．青蒿素的合成量为１９０μｇ／ｇ干细胞左右．当在第２步培养中加入青蒿素合成前体青蒿酸，青蒿素合成量比仅靠激素诱导提高了３倍多．青蒿素的合成途径是植物固醇合成途径的分支途径，当在青蒿素合成过程即第２步培养中加入固醇生物合成抑制剂双氯苯咪唑和氯化氯胆碱处理，可使代谢向合成青蒿素的方向移动，青蒿素合成量明显提高．经２００ｍｇ／Ｌ氯化氯胆碱处理２ｄ，黄花蒿细胞合成青蒿素量为３７２μｇ／ｇ干细胞；经２０ｍｇ／Ｌ双氯苯咪唑处理４ｄ，黄花蒿细胞合成青蒿素量为１５４０μｇ／ｇ干细胞，比靠激素诱导提高了８倍多，与诱导脱分化细胞的黄花蒿叶中所含的青蒿素（３０００μｇ／ｇ干细胞）处于同一个数量级．以上结果表明：在通过植物激素调节可以合成青蒿素的黄花蒿培养细胞中，缺乏青蒿素合成前体是青蒿素合成量低的重要原因．因此，在青蒿素合成的过程中通过体外调节，?