幽门螺杆菌对人胃癌细胞SGC-7901中SHP-2及细胞骨架的影响

摘要

目的:研究幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,H pylori)刺激人胃癌细胞SGC-7901后,对细胞内SHP-2表达及细胞骨架的影响.方法:将临床分离的胃癌H pylori菌体裂解,以超声提取物刺激SGC-7901细胞1h,逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)半定量法测定刺激前后SHP-2表达量的变化;并将PCR产物进行克隆和测序.将不同疾病(胃炎,胃溃疡,胃癌)的菌株H pylori超声提取物刺激SGC-7901细胞10min,采用phalloidin对细胞内骨架进行荧光染色,研究其对细胞骨架的影响.将野生型和突变型RhoA质粒转入细胞后,再以胃癌H pylori超声提取物刺激,进一步观察细胞内骨架的变化.结果:胃癌H pylori菌体超声提取物刺激SGC-7901细胞1h后,细胞内SHP-2表达量没有明显变化.胃炎,胃溃疡,胃癌H pylori菌体超声提取物刺激人胃癌细胞SGC-7901后,与对照组相比,细胞内骨架增多(65.4±0.510,63.37±0.475,64.53±0.522vs20.34±1.376,均P<0.05),但这三种菌株间相比无统计学意义.转染入野生型RhoA质粒的细胞经胃癌H pylori菌体超声提取物刺激后,细胞内骨架较未转染者增多(72.99±1.818vs61.78±1.288,P<0.05),而转染入无活性突变型RhoA质粒的细胞经刺激后,细胞内骨架与未转染者无明显差别.结论:胃癌H pylori超声提取物未能引起细胞内SHP-2mRNA表达量的改变;胃炎,胃溃疡,胃癌H pylori菌体超声提取物能够增加细胞内骨架的形成,其作用与H pylori菌种无关,RhoA活性的增强是其中的一个重要中间环节.