应用CompBeads建立流式多色分析补偿的方法

摘要

目的探讨一种快速简便的流式细胞仪多色分析时的关键参数(荧光补偿)设置方法。方法以BDComp-Beads、实验样品(本实验为慢性乙型肝炎患者外周全血)分别与单克隆荧光抗体染色,结合流式细胞仪Diva软件调节细胞仪光电倍增管(PMT)电压,计算建立荧光补偿矩阵。同时以获得的参数设置仪器,运行慢性乙型肝炎患者外周全血6色荧光标记实验样品。结果用CompBeads建立的补偿参数稳定可靠,能有效消除荧光光谱之间的交叉重叠。6色荧光标记实验样品检测的结果,可见细胞亚群分布清晰,荧光强度比例表达适当,与通常采用的实验样品单染色方法补偿结果一致(P>0.05)。结论该方法能快速方便进行流式细胞仪检测时仪器参数最佳化设置调整,在多色免疫标记流式检测中有较大的应用价值。