鸭肝碱性磷酸酶的分离纯化及其部分性质研究

摘要

经过匀浆、正丁醇除脂、硫酸铵分级分离、DEAE-Sepharose Fast Flow离子交换柱层析、Sephacryl S-200凝胶过滤等步骤,从鸭肝中分离纯化出电泳纯的碱性磷酸酶,该酶纯化倍数达58.3倍,比活为337.4 U/mg.经SDS-PAGE和凝胶过滤测得该酶的全分子量为121.0 kD,亚基分子量为60.5 kD.以磷酸苯二钠为底物,测得该酶的最适pH为9.0,最适温度为40℃.Na+、K+、Li+等一价离子对该酶活性基本无影响,Mg2+、Mn2+对该酶活性有激活作用,Cd2+对该酶活性有抑制作用.米氏常数Km为1.28 mmol/L.