桃红四物汤对大鼠血管吻合模型吻合区Delta-like4表达及血管新生的影响

摘要

目的:观察桃红四物汤对大鼠血管吻合模型吻合区Delta-like4表达及血管新生的影响。方法:将40只3月龄SPF级SD大鼠随机分为空白对照组、假手术组、生理盐水组、桃红四物汤组,每组10只。桃红四物汤组、生理盐水组行尾部动脉血管离断后吻合术;假手术组仅在相应区域作切口,不进行血管离断吻合;空白对照组不做任何处理。造模术后桃红四物汤组以20 mL·kg^(-1)剂量的桃红四物汤灌胃,生理盐水组给予等量生理盐水灌胃,每日灌胃2次;假手术组和空白对照组不给予任何药物干预。分别在药物干预开始后2 d、5 d从各组随机抽取5只大鼠,采用颈椎脱臼法处死后,桃红四物汤组和生理盐水组切取尾部的吻合处血管,假手术组和空白对照组切取尾部相应部位动脉血管。将所取血管组织制成石蜡切片,分成2份,1份采用免疫组化法检测血管吻合区Delta-like4的蛋白表达(光镜下灰度值与Delta-like4的蛋白表达量呈反比);1份经HE染色后测量吻合区血管内膜面积。结果:(1)血管吻合区Delta-like4的蛋白表达。药物干预开始后2 d,4组大鼠血管吻合区Delta-like4蛋白表达的灰度值比较,差异无统计学意义(126.27±20.56,111.73±7.99,119.30±16.71,124.53±7.35,F=0.624,P=0.062)。药物干预开始后5 d,4组大鼠血管吻合区Delta-like4蛋白表达的灰度值比较,差异有统计学意义(85.60±5.58,99.07±3.84,103.13±11.61,111.60±4.49,F=7.041,P=0.012);进一步两两比较,桃红四物汤组血管吻合区Delta-like4蛋白表达的灰度值低于生理盐水组(LSD-t=-2.334,P=0.048)、假手术组(LSD-t=-3.035,P=0.016)、空白对照组(LSD-t=-4.450,P=0.002);生理盐水组血管吻合区Delta-like4蛋白表达的灰度值与假手术组、空白对照组比较,差异均无统计学意义(LSD-t=-0.703,P=0.502;LSD-t=-2.166,P=0.062);假手术组血管吻合区Delta-like4蛋白表达的灰度值与空白对照组比较,差异无统计学意义(LSD-t=-1.464,P=0.181)。(2)吻合区血管内膜面积。药物干预开始后2 d,4组大鼠吻合区血管内膜面积比较,差异无统计学意义[(0.20±0.01)mm^2,(0.18±0.02)mm^2,(0.16±0.01)mm^2,(0.17±0.02)mm^2,F=2.625,P=0.122)。药物干预开始后5 d,4组大鼠吻合区血管内膜面积比较,差异有统计学意义[(0.30±0.02)mm2,(0.20±0.01)mm^2,(0.21±0.01)mm^2,(0.21±0.01)mm^2,F=17.063,P=0.000];进一步两两比较,桃红四物汤组吻合区血管内膜面积大于生理盐水组(LSD-t=-46.275,P=0.020)、假手术组(LSD-t=-68.142,P=0.000)、空白对照组(LSD-t=-66.154,P=0.000);生理盐水组吻合区血管内膜面积与假手术组、空白对照组比较,差异均无统计学意义(LSD-t=-2.187,P=0.060;LSD-t=-1.988,P=0.082);假手术组吻合区血管内膜面积与空白对照组比较,差异无统计学意义(LSD-t=0.199,P=0.847)。结论:桃红四物汤能上调血管吻合大鼠模型吻合区Delta-like4的表达,促进血管新生。