富含RNA酶组织总RNA提取方法的改良

摘要

目的:简化富含RNA酶组织RNA的抽提方法. 方法:健康SD大鼠10只,随机分成液氮组及改良组,每组5只,用乙醚麻醉后,分别取胰腺组织约50 mg,液氮组组织迅速放入液氮中,改良组组织放入一预装RNAguard 100μL的1.5 mL EP管中,放入-70℃冰箱保存.液氮组将胰腺组织从液氮中取出,立即放入预装适量液氮的研钵中迅速研磨至粉末(研磨过程中始终保持研钵内有适量液氮),移入另一1.5 mL EP管中,加入1 mL Trizol, 按Trizol法提取总RNA;改良组取眼科剪在酒精灯上消毒后冷却,从-70℃冰箱中取出冻存的组织,在冰盒上,加入1 mL Trizol,用眼科剪迅速剪切3 min(剪切过程组织不解冻),剧烈振荡混匀30 s,以后步骤按Trizol法. 结果:改良法抽提RNA的效果与液氮研磨法无显著差异(P>0.05),但方法简单方便. 结论:改良法提取RNA简单方便,结果稳定。