应用异型双功能交联剂制备酶-抗体结合物

摘要

酶标免疫测定法（ELISA）中最关键的化合物是酶-抗体结合物,将酶和抗体交联起来需用交联剂。本文作者使用了N-琥珀酰亚胺基3-（2-吡啶基二硫）丙酸酯（简称SPDP）将辣根过氧化物酶（HRP）和兔抗小鼠IgG（兔IgG）交联起来。我们试验了SPDP/HRP,SPDP/IgG和HRP/IgG的不同比例,以期获得活性高的酶-抗体结合物。此外还研究了从结合物中去除自由HRP和自由IgG的方法。用SDS-PAGE及硝酸纤维膜电泳转移法证明本法制备的结合物不含HRP及IgG的自身聚合物。用ELISA法鉴定结合物制品时,一般稀释度可达到1:10,000以上,有的可达到1:20,000(当结合物浓度A280nm=1.0,底物显色A492nm=1.0时)。