培养的人主动脉平滑肌细胞合成的蛋白聚糖的生化分析

摘要

人胎儿主动脉平滑肌细胞（SMC8）体外培养的第4（T4）及第10(T10)代细胞在含[35S]-硫酸钠的培养液中培养以标记蛋白聚糖（PG）。培养液及细胞层的4mol/L盐酸胍提取液中的PG8用DEAE-Sephacel离子交换及凝胶过滤柱层析纯化。两代(T4及T10)培养液中均含有一种分子较大及大小类似的硫酸软骨素-PG（CS-PG,在Sepharose CL-4B柱的排阻部位洗脱）,其相对含量在T4为20.8％,T10为12.9％,另外尚均含有一种分子较小及大小类似的硫酸皮肤素-硫酸软骨素-PG（DS-CS-PG,Kd=0.27-0.33,Sepharose CL-4B）,其相对含量在T4为72.7％,T10为81.5％。两代细胞层中除有一种与培养液中大小类似的CS-PG外(其相对含量在T4为21.7％,T10为10.2％),尚均含有一种分子较小（小于培养液中者）的DS-CS-PG（Kd=0.53,Sepharose CL-4B）,其相对含量在T4为57.4％,T10为75.0％。另外,两代培养液及细胞层中均含有硫酸乙酰肝素-PG（HS-PG）,在T4及T10培养液中分别为6.5％及5.6％;而在细胞层中则分别为20.9％及14.8％。T10的培养液及细胞层中DS-CS-PG的[35S]参入量均高于T4者;而CS-PG及HS-PG则相反。T10除有PG合成变化外尚有其他衰老迹象（如脂质堆积等）,故SMC8的老化可能与动脉粥样硬化病变形成有关。