马氏钳蝎毒昆虫类神经毒素的分离、纯化及性质研究

摘要

经Sephadex G-50,sp-Sephadex C-25二步柱层析法,从山东马氏钳蝎（Bu-thus martensii Karch）粗毒中分离出四种对美洲（虫非）蠊有强直麻痹反应的毒性蛋白组份。其中二个组分在SDS聚丙烯酰胺电泳和等电聚焦电泳上均呈现单一区带,命名为BmK IT-Ⅰ,BmK IT-Ⅱ其pI分别为8.2和8.4,分子量分别为8400和7560。同时还分析了二个组份的氨基酸组成。经DABITC/PITC双偶合法测定了BmKIT-Ⅰ和BmK IT-Ⅱ的N端部份氨基酸排列顺序,它们分别为H2NVal.Arg.Asp.Ala……H2NVal.Arg.Asp.Gly……。 电生理学研究表明,纯化的BmK IT-I(1×10-5g/ml)对（虫非）蠊腹Ⅵ神经节的突触传递有阻断作用,阻断后用生理溶液洗,则突触传递可恢复。从同一蝎毒粗毒中分离纯化的哺乳动物类神经毒素BmKⅢ在浓度高出100倍(1×10-3g/ml)时也可以阻断（虫非）蠊腹Ⅵ神经节的突触传递,但用生理溶液冲洗没有观察到恢复。