人α-心钠素全基因的化学合成

摘要

用固相亚磷酰胺法（solid-phase phosphoramidite method）合成了人α-心钠素（简称α-hANP）的全基因。合成的α-hANP基因全长为96bp,包括编码α-hANP的结构基因、基因5＇端的谷氨酸（作为表达产物用内肽酶Glu-C专一裂解的位点）密码子GAA、基因3＇端的终止信号TGA及基因两端的接头部分。基因分7个寡聚核苷酸片段在DNA合成仪上合成,然后一次性酶促连接成为完整的α—hANP双链基因。化学合成的基因克隆到M13载体上,经分子杂交鉴定筛选出的α-hANP基因克隆株,用双脱氧链终止法进行序列分析,证明核苷酸顺序正确。