B22Asn人胰岛素突变体的研究

摘要

通过ＤＮＡ定点突变法将人胰岛素Ｂ２２Ａｒｇ改造成Ｂ２２Ａｓｎ，去除其一级结构中碱性蛋白酶位点，以期提高胰岛素在体内的稳定性。突变体基因克隆到表达载体ｐＢＶ２２０中，在Ｅ．ｃｏｌｉＤＨ５α中进行表达。分离纯化后的表达产物经胰蛋白酶和羧肽酶Ｂ联合作用获得重组Ｂ２２Ａｓｎ－人胰岛素．该突变胰岛素具有抗胰蛋白酶水解能力，但是其与受体的结合能力只有标准猪胰岛素的１２．４％．胰岛素结构中Ｂ２２Ａｒｇ可能在胰岛素与其受体结合过程中起重要作用。