nutR中的突变对λ噬菌体早期转录抗终止作用的影响

摘要

将λＤＮＡ的ｎｕｔＲ序列置于Ｌａｃ启动子的下游，在ｎｕｔＲ和β－半乳糖苷酶基因（ｇａｌＫ）之间插入λ噬茵体依赖ｒｈｏ的终止子ｔＲ１，使ｇａｌＫ的表达取决于Ｎ蛋白介导的转录抗终止作用。为研究ｎｕｔＲ对抗终止的影响，系统地进行了该序列中每个碱基的点突变（Ａ→Ｃ，Ｇ→Ｔ，Ｃ→Ａ及Ｔ→Ｇ）．结果表明ｂｏｘＡ中有两个碱基（位置２和５）的突变对抗终止作用是至关重要的，使抗终止效率降低了１０倍；而其他位置的改变影响甚微。ｂｏｘＡ的缺失在ｎｕｓ￣＋宿主中使抗终止数率降低了４０％，但在ｎｕｓＢ宿主中却恢复到野生型水平。ｂｏｘＢ茎环结构中，茎部顶端的碱基对及环中邻近茎部的两个碱基的突变对抗终止作用影响很大，被认为是Ｎ蛋白的识别序列．ｂｏｘＡ和ｂｏｘＢ之间的间隔序列中有两个碱基的突变几乎使抗终止作用丧失。