重组水蛭素HV2的稳定性

摘要

重组水蛭素ＨＶ２是凝血酶的特异性抑制剂，是一种非常稳定的蛋白质。温度的升高（１００℃水浴）和ｐＨ（１─１３）的改变不影响其活力，在某些变性剂（８ｍｏｌ／Ｌ尿素、１％ＳＤＳ和６ｍｏｌ／Ｌ盐酸胍）存在的条件下也非常稳定，０．１ｍｏｌ／Ｌ的ＤＴＴ在７０℃时使其部分失活，只有ｐＨ和温度同时升高其活力才开始下降，ｐＨ１３、８０℃处理１５ｍｉｎ即完全失活，氨基酸组成和活性分析发现失活样品的Ｃｙｓ和Ｌｙｓ被破坏。重组水蛭素ＨＶ２含有一个结构紧密的Ｎ端核心区和一个无序的Ｃ端尾部。其Ｎ端的３个Ｌｙｓ－Ｘａａ键均不被胰蛋白酶水解；胃蛋白酶及糜蛋白酶消化后，分离所得片段，氨基酸组成分析发现Ｎ端核心区依然保持很高的抗凝血酶活性，继续消化２４ｈ，核心区不被进一步降解。