大鼠肝CTP:磷酸胆碱胞苷酰转移酶的部分纯化及其特性

摘要

介绍一种部分纯化CTP:磷酸胆碱胞苷酰转移酶（CT）的方法,并对部分纯化CT的性质进行了研究。经盐析、DEAE-纤维素、磷酸-纤维素及CTP-聚琼脂糖柱层析可将大鼠肝胞液中的CT纯化100倍以上,结果重复性好。CT在胞液中及经初步纯化性质稳定,但进一步纯化则其活性很易丧失。鼠肝总磷脂及油酸可激活CT、使其聚合,磷脂酰絲氨酸是其中起主要作用的CT激活物;CT聚合物可被辛基-葡萄糖苷解聚,且保留80％酶活性。用CT常规底物CTP的类似物观察CT的特异性,发现dCTP是比CTP更好的底物,CDP、dCDP能抑制CT对CTP或dCTP的作用,而CMP、dCMP对酶活性无影响。结果提示分子中糖的2′-OH并非CT底物所必需,而和胞苷相连的三个磷酸则不可缺少。