直接酶标——化学发光分子杂交体系的建立

摘要

本文通过调整发光剂、氧化剂、发光增强剂的浓度,并加入一组辅助剂,改进了依赖过氧化物酶化学发光液的配方。并通过比较实验证明:该发光液的检测灵敏度高于其它原有的发光液,同时还发现合成后的酶标复合物可经CM-32离子交换柱阶段洗脱纯化,以提高杂交灵敏度。从而建立了一套直接酶标DNA探针——化学发光自显影分子杂交体系。其狭缝杂交灵敏度可达0.03pg。并利用该体系进行了单拷贝基因分析,Western印迹杂交及检测血清HBV DNA等的应用研究。