用多引物PCR分析γ射线引起人外周血淋巴细胞hprt基因突变

摘要

正常人外周血用６０Ｃｏ射线分别进行１～８Ｇｙ照射后，在含６－ＴＧ的培养基上克隆和筛选人淋巴细胞ｈｐｒｔ突变细胞。细胞的突变频率与γ射线的照射剂量呈正相关．获得４２个ｈｐｒｔ突变细胞株，用８对ｈｐｒｔ寡核苷酸引物进行多聚酶链反应（ＰＣＲ）从细胞粗提物中分别扩增ｈｐｒｔ各个外显子，分析突变细胞的ｈｐｒｔ基因突变，约６０％（２５／４２）的ｈｐｒｔ基因突变为基因缺失，其中１３个突变是ｈｐｒｔ基因全部缺失，而１２个是部分ｈｐｒｔ基因外显子缺失，约有４０％（１７／４２）的突变无明显的ＰＣＲ扩增变化．同时显示ｈｐｒｔ基因外显子的缺失突变与辐射剂量有关，实验结果提示，此方法有可能用于估计辐射剂量和进行辐射远后效果观察，进而揭示辐射致突的分子机理．