NOX1与NF-κB对TNF-α诱导A549细胞氧化损伤的影响

摘要

目的探讨酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶1(NOX1)和核转录因子-κB(NF-κB)在肿瘤坏死因子-α(TNF-α)诱导A549细胞发生氧化损伤中的关系。方法①以质量浓度为0.0、10.0、25.0和50.0μg/L的TNF-α刺激A549细胞,采用CCK-8实验检测各组细胞抑制率,选择合适的TNF-α刺激浓度。②取对数生长期A549细胞分为空白对照组、溶剂对照组、TNF-α组、二亚苯基碘(DPI)组和TNF-α+DPI组进行NOX1抑制实验。取对数生长期A549细胞分为空白对照组、TNF-α组、BAY11-7082组和TNF-α+BAY11-7082组进行NF-κB抑制实验。以蛋白印迹法检测各组细胞NOX1和p65相对表达水平,以流式细胞术检测细胞内活性氧(ROS)相对表达水平。结果①随着TNF-α剂量的增加,A549细胞的抑制率增加(P<0.05),选择25.0μg/L作为后续实验TNF-α刺激剂量。②TNF-α组细胞NOX1、p65蛋白及ROS相对表达水平分别高于空白对照组、溶剂对照组和DPI组(P<0.05);TNF-α+DPI组细胞上述指标均低于TNF-α组(P<0.05),但高于DPI组(P<0.05)。TNF-α组细胞NOX1、p65蛋白及ROS相对表达水平分别高于空白对照组和BAY11-7082组(P<0.05),TNF-α+BAY11-7082组细胞上述指标均低于TNF-α组(P<0.05)。结论抑制NOX1或NF-κB均可减轻TNF-α诱导的A549细胞氧化损伤。