中波紫外线联合纳米碳酸钙处理对HaCaT细胞影响研究

摘要

目的研究中波紫外线（UVB）联合纳米碳酸钙处理对HaCaT细胞增殖、凋亡的影响及其机制。方法取对数生长期HaCaT细胞分为对照组、UVB照射组、纳米碳酸钙组和联合处理组4组,UVB照射组和联合处理组接受累计照射剂量为2.97×10^-2J/cm^2的UVB照射,对照组和纳米碳酸钙组给予同等条件下假照射。照射完毕后,对照组和UVB照射组分别用含体积分数为10.00%磷酸盐缓冲液的高糖达尔伯克氏改良伊格尔培养基（DMEM）继续培养,纳米碳酸钙组和联合处理组分别用含质量浓度为250 mg/L纳米碳酸钙的高糖DMEM继续培养。于培养后0、6、12、18、24 h收获细胞,采用噻唑蓝法检测细胞活性,流式细胞术检测细胞凋亡率,免疫印迹法检测凋亡相关蛋白P53和Caspase-3表达情况。结果与同时间点对照组比较,除UVB照射组在6 h时间点差异无统计学意义外（P〉0.05）,其余各处理组在6~24 h各个时间点HaCaT细胞活力均下降（P〈0.05）;联合处理组HaCaT细胞活力在6~24 h各个时间点均低于同时间点UVB照射组（P〈0.05）,在18和24 h均低于同时间点纳米碳酸钙组（P〈0.05）。UVB照射组HaCaT细胞凋亡率高于对照组（P〈0.05）,联合处理组HaCaT细胞凋亡率高于其余3组（P〈0.05）。P53、Caspase-3蛋白表达水平在UVB照射组和纳米碳酸钙组HaCaT细胞均较对照组表达上调;联合处理组HaCaT细胞P53和Caspase-3蛋白的表达水平均高于其余3组。结论 UVB联合纳米碳酸钙处理对HaCaT细胞的损伤效应较单一损伤因素更严重,表现为抑制细胞增殖,诱导细胞凋亡,促进P53及Caspase-3蛋白表达。