肝素对急性肝损伤小鼠保护作用及对细胞外组蛋白水平影响

摘要

目的研究肝素对D-氨基半乳糖联合脂多糖(Gal N/LPS)染毒所致小鼠急性肝损伤的保护效应,探讨其作用机制是否通过作用于细胞外组蛋白而实现。方法 1肝素保护作用实验(体内实验)。无特定病原体级健康雄性C57BL/6小鼠随机分为正常对照组(6只)、肝素对照组(6只)、肝损伤组(8只)和肝素干预组(8只)。肝损伤组和肝素干预组小鼠均一次性腹腔注射Gal N 600 mg/kg体质量和LPS 20μg/kg体质量进行急性肝损伤造模,肝素干预组小鼠同时经皮下注射肝素300 U/kg体质量;正常对照组和肝素对照组小鼠分别予一次性腹腔注射等体积质量分数为0.9%的氯化钠溶液或肝素300 U/kg体质量。染毒后12 h时间点,采集4组小鼠静脉血分离血浆检测肝损伤指标、细胞外组蛋白和相关细胞因子的水平,并进行肝组织病理学观察。另设急性肝损伤组和肝素干预组小鼠,每组10只,观察染毒后24 h的生存率。2肝素-细胞外组蛋白结合实验(离体实验)。取肝损伤组小鼠血浆,按照1∶1比例与分别加入肝素琼脂糖凝胶CL-6B(肝素组)和二乙氨基乙醇琼脂糖凝胶(对照组),孵育1 h后分离上清液,检测细胞外组蛋白和细胞因子水平化。结果 1体内实验。染毒处理后12 h时间点,肝损伤组小鼠出现大量肝细胞变性和坏死的急性肝损伤组织病理学改变,而肝素干预组小鼠肝细胞损伤程度及范围均较肝损伤组明显减轻。与正常对照组比较,肝损伤组小鼠血浆丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、总胆红素(T-BIL)、细胞外组蛋白、白细胞介素(IL)-1β、IL-6、IL-10和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平均升高(P0.05)。结论肝素可以减轻Gal N/LPS诱导的小鼠急性肝损伤,其机制可能与降低细胞外组蛋白及细胞因子的水平有关。