石斛生物碱抑制宫颈癌细胞SiHa恶性生物学行为

摘要

石斛生物碱(Dendrobium nobile Lindl.alkaloids,DNLA)可促进乳腺癌和结肠癌细胞凋亡,但其是否影响宫颈癌细胞的恶性生物学行为还未知。该文探究了DNLA对宫颈癌SiHa细胞的增殖、凋亡、迁移和侵袭的影响及可能机制。将不同剂量(15、30、60 ng/mL)DNLA作用于SiHa细胞,转染si-NC、si-KCNQ1OT1、miR-NC、miR-487a-3p mimics、pcDNA-NC或pcDNA-KCNQ1OT1至SiHa细胞,或60 ng/mL DNLA作用于转染pcDNA-NC或pcDNA-KCNQ1OT1的SiHa细胞后,CCK-8法检测细胞增殖,Transwell检测细胞迁移和侵袭,流式细胞术检测细胞凋亡,蛋白质印迹法检测细胞中MMP2、MMP9、切割胱天蛋白酶3基因在蛋白质水平的表达量,RT-qPCR检测KCNQ1OT1和miR-487a-3p表达。双荧光素酶报告基因实验验证KCNQ1OT1和miR-487a-3p调控关系。结果表明,不同剂量(15、30、60 ng/mL)DNLA可降低SiHa细胞吸光度值、迁移数、侵袭数、MMP2和MMP9基因在蛋白质水平的表达量及KCNQ1OT1表达,而提高细胞凋亡率、切割胱天蛋白酶3基因在蛋白质水平的表达及miR-487a-3p表达(P<0.05)。低表达KCNQ1OT1或高表达miR-487a-3p均可降低SiHa细胞吸光度值、迁移数、侵袭数及MMP2和MMP9基因在蛋白质水平的表达量(P<0.05),而提高细胞凋亡率和切割胱天蛋白酶3基因在蛋白质水平的表达量(P<0.05)。KCNQ1OT1靶向负调控miR-487a-3p的表达。高表达KCNQ1OT1对SiHa细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭的影响与低表达KCNQ1OT1相反,且高表达KCNQ1OT1降低了60 ng/mL DNLA对SiHa细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭的影响。综上所述,DNLA可能通过调控KCNQ1OT1/miR-487a-3p轴降低宫颈癌SiHa细胞的增殖、迁移和侵袭能力,并促进SiHa细胞凋亡。