梅毒螺旋体Tp92蛋白T细胞表位的预测与鉴定

摘要

目的预测和鉴定梅毒螺旋体(Treponema pallidum,Tp)Tp92蛋白的Th细胞表位,为深入探讨这些表位在梅毒表位疫苗中的作用奠定基础。方法采用RANKPEP和SYFPEITHI软件分析工具联合预测Tp92蛋白的Th细胞表位,人工合成5条表位多肽,以5条表位多肽(同时设Con A阳性对照和RPMI-1640阴性对照)分别刺激梅毒患者和正常人外周血单个核细胞(PBMC),用CCK-8法鉴定预测的Th细胞表位,进一步以ELISA检测INF-γ和IL-4的分泌水平,区分Th细胞表位的类型。结果软件预测显示,Tp92蛋白的P1(103-118AA)、P2(694-712AA)、P3(668-680AA)、P4(300-313AA)、P5(396-410AA)氨基酸序列最可能为其Th细胞表位。CCK-8法检测显示,P2、P3、P5能诱导梅毒患者淋巴细胞明显增殖,而正常人淋巴细胞不反应;ELISA检测细胞因子产生情况发现:P2、P3、P5可刺激梅毒患者淋巴细胞产生较高水平IFN-γ,而不产生IL-4。结论 P2、P3、P5为Tp92蛋白潜在的HLA-DRBl限制性特异性Th1型细胞表位。