环介导等温扩增快速检测B群链球菌的临床应用

摘要

目的建立采用环介导等温扩增（LAMP）技术从临床标本中快速检测B群链球菌的方法。方法根据美国国家生物信息中心上提交的B群链球菌的cfb基因序列（登陆号X72754）设计特异LAMP引物，以热裂解法提取标本中细菌的DNA，然后以LAMP技术扩增cfb基因来鉴定其是否为B群链球菌。在采用LAMP技术检测B群链球菌的同时，以选择性培养法和PCR技术平行检测相同标本，并将3种方法的检测结果比较。结果在176例阴道拭子和176例直肠拭子中，选择性培养法检测到的B群链球菌例数为49和61、LAMP法检测到的B群链球菌例数为49和59，PCR法检测到的B群链球菌例数为48和58。以选择性培养法为金标准，LAMP法检测B群链球菌的灵敏度和特异度分别为96．7％和100％，PCR法检测B群链球菌的灵敏度和特异度分别为95．1％和100％。LAMP法检测B群链球菌的时间为2h左右，模拟菌株的检测结果显示该方法的最低检测限为10^2CFU／mL。结论该方法灵敏度高，特异性强，操作方便简单，适合从临床标本中快速检测B群链球菌。