MicroRNA-449a/b抑制人结肠癌细胞内Fra-1的表达

摘要

MicroRNAs(miRNAs)是一类长度约为22 nt的非编码的调控性小RNA,它们在诸多的生命活动中发挥重要作用,如参与调控细胞的增殖、分化、凋亡以及肿瘤的发生发展.MicroRNA-449a/b(miR-449a/b)是脊椎动物中进化保守的miRNA,作为抑癌基因,参与了许多癌症的发生过程,但其在结肠癌中的作用尚不清楚.本文利用实时荧光定量技术研究了miR-449a/b在结肠癌组织中的表达.利用双荧光素酶报告基因检测系统及Western印迹鉴定miR-449a/b的靶基因.应用MTS法和Transwell分别检测miR-449a/b对结肠癌细胞增殖和迁移的影响.检测组蛋白乙酰化酶抑制剂曲古菌素A(trichostatin A,TSA)对结肠癌细胞中miR-449a/b表达的影响.研究结果表明:与正常结肠组织相比,miR-449a/b在结肠癌组织中低表达;miR-449a/b能够结合到FRA-1 mRNA 3'-非翻译区(3'-untranslated region,3'-UTR),从而抑制结肠癌细胞HCT116内源Fra-1的表达;外源转染miR-449a/b明显抑制结肠癌细胞HCT116的增殖和迁移;并且TSA处理能够诱导结肠癌细胞HCT116中miR-449a/b的表达.以上结果提示:miR-449a/b可能通过抑制靶基因Fra-1的表达,进而抑制结肠癌细胞的增殖和迁移.