蜗牛酶中一种β-葡萄糖苷酶的纯化及酶学性质的研究

摘要

通过DEAE-Sepharose离子交换层析和SephadexG-100凝胶过滤层析的联用从中华白玉蜗牛消化酶中分离出1种具有人参皂苷Rb1水解活性的β-葡萄糖苷酶。纯化后该酶在SDS-PAGE上呈单一蛋白质条带。反应最适pH为5.6,最适温度是80℃。pH稳定范围很广,在pH为4.0～11.0的溶液中和温度60℃以下保持长时间稳定状态,是一个耐碱和中等耐热的糖苷酶。Na+、K+、Li+、Ca2+、Mg2+、EDTA、DTT和SDS不影响该酶活性,而Cu2+、Ag+和Fe3+对该酶则具有明显的抑制作用。pNPG为底物的动力学参数Km和Vmax分别为0.182mmol/L和0.189μmol/(min.mg)。