lncRNA TMEM161B-AS1通过调控hsa-miR-135b对高糖诱导肾小管上皮细胞增殖和凋亡的影响

摘要

目的探究长链非编码RNA(lncRNA)TMEM161B-AS1对高糖诱导肾小管上皮细胞增殖和凋亡的影响及其分子机制。方法以含30 mmol/L葡萄糖的培养基体外培养人肾小管细胞HK-2,分别转染TMEM161B-AS1过表达载体和阴性对照载体,设为TMEM161B-AS1组和对照组。qRT-PCR检测各组细胞TMEM161B-AS1和hsa-miR-135b表达。CCK-8法和流式细胞术分别检测各组细胞增殖和细胞凋亡情况。通过生物信息学软件LNCediting预测TMEM161B-AS1的靶基因,双荧光素酶报告基因实验检测不同细胞的相对荧光素酶活性。Western blot检测细胞上皮-间质转化表型蛋白的表达情况。结果与对照组比较,TMEM161B-AS1组细胞TMEM161B-AS1表达水平明显升高,hsa-miR-135b表达水平及细胞凋亡率明显降低(P<0.01)。与对照组比较,TMEM161B-AS1组细胞培养2~5 d增殖能力明显升高(P<0.05)。与转染has-miR-NC比较,转染hsa-miR-135b能显著降低HK-2细胞TMEM161B-AS1 WT的荧光素酶活性(P<0.01)。与对照组比较,TMEM161B-AS1组上皮细胞表型蛋白ZO-1、E-Cadherin、Claudin-1表达明显增加,间质细胞表型蛋白α-SMA、Fibronectin表达明显降低(P<0.05)。结论lncRNA TMEM161B-AS1通过下调hsa-miR-135b表达,促进高糖诱导肾小管上皮细胞的增殖,抑制其凋亡及上皮-间质转化。