基于“IL-34”-Rho/Rock信号通路探讨生地黄水煎总提物对动脉粥样硬化的作用分析

摘要

目的观察生地黄水煎总提物对动脉粥样硬化(AS) Apo E-/-小鼠脂质斑块的改善作用以及对"IL-34"-Rho/Rock通路的影响。方法①动物实验:将40只Apo E-/-小鼠分成空白对照组(CTL组)、模型对照组(Model组)、5μg·g^(-1)生地黄干预组(Reh-L组)和10μg·g^(-1)生地黄干预组(Reh-H组)。空白对照组小鼠给予普通饲料,其余组小鼠腹腔注射人血清低密度脂蛋白(LDL) 2周,并喂以高脂饲料。连续灌胃4周,检测小鼠血脂指标,并计算AS指数(AI)。②细胞实验:将RAW264. 7细胞分为空白对照组(con组)、ox-LDL组、IL-34组和Reh组;油红O染色观察泡沫细胞形成,检测细胞内胆固醇酯含量和胆固醇流出率。免疫荧光染色法、qRT-PCR法和Western blot法检测Rho A和Rock1表达量。结果①动物实验:Reh-H组小鼠外周血TC、TG、LDL-C、内皮素-1(ET-1)、白介素-34(IL-34)、单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)、巨噬细胞炎性蛋白2(MIP-2)水平、AI值以及AS斑块面积比低于Model组和Reh-L组,而HDL-C水平高于Model组和Reh-L组(P <0. 05)。经qRT-PCR法和Western blot法检测,Reh-H组小鼠主动脉组织Rho A和Rock1表达量较Model组和Reh-L组降低(P <0. 05)。②细胞实验:经oxLDL和IL-34共诱导,RAW264. 7细胞内胆固醇酯含量、胆固醇流出率以及Rho A和Rock1蛋白表达量较con组和ox-LDL组细胞增加(P <0. 05)。而加入Reh干预后泡沫细胞数量、胆固醇酯含量、胆固醇流出率以及RAW264. 7细胞Rho A和Rock1蛋白表达量较IL-34组细胞明显减少(P <0. 05)。结论生地黄可通过抑制"IL-34"-Rho/Rock信号通路抑制巨噬细胞吞噬脂质形成泡沫细胞,从而有效地预防AS的形成和进展。