含有弓形虫表面抗原P22、P30复合基因的载体构建

摘要

目的选择弓形虫表面抗原P22、P30的有效基因片段,共同构建在同一克隆载体pUC19和表达载体pGEMEXTM-1上,并保证其连接方向及开放读码框的正确.方法根据已发表P30基因序列,用PCR技术调取所需基因片段,P22基因片段来自重组质粒pGEX-2T-v22,将两片段定向克隆于克隆载体pUC19及表达质粒pGEMEXTM-1上,用酶切及测序的方法对重组子进行鉴定.结果酶切产物经电泳显示条带清晰,P22、P30基因片段的泳动位置分别在446bp和860bp的位置,与预计结果一致;测序结果表明插入的复合基因片段方向及序列均正确.结论成功构建的含有P22、P30基因片段的质粒重组体,保证了两基因连接方向、序列及开放读码框的正确,为今后两基因的进一步复合表达研究奠定了基础.