用复合PCR检测炭疽芽孢的研究

摘要

目的建立同时检测炭疽芽孢杆菌两个毒力相关质粒基因的复合PCR技术,并用于模拟污染土壤中炭疽芽孢的检测.方法根据炭疽芽孢杆菌两个毒力相关质粒pX01和pX02上的水肿因子和荚膜基因设计引物,并探讨建立复合PCR同时扩增这两种基因的方法,评价其特异性和敏感性,并将炭疽芽孢杆菌疫苗株A16.R的芽孢加入土壤制备污染土壤,用复合PCR检测其中的芽孢,评价该方法的实用性.结果我们发现在影响复合PCR的条件中,不同引物的比例与浓度条件最为关键;复合PCR检测的敏感性比单一基因PCR检测敏感性低10倍.用复合和单一PCR检测土壤中的炭疽芽孢表明,二者都能检测出0.25g土壤中的103个芽孢.结论我们建立的复合PCR能够特异敏感的检测土壤中的炭疽芽孢.