杜氏利什曼原虫LACK抗原基因的克隆和表达

摘要

目的在大肠杆菌中高效表达纯化杜氏利什曼原虫的LACK抗原.方法以本实验室的重组质粒T-LACK为模板,PCR扩增得到LACK抗原基因,与表达载体pQE31定向重组,转化到宿主菌M15中进行表达和纯化,并以SDS-PAGE和Western-blotting进行鉴定.结果 1.SDS-PAGE电泳检测,重组质粒pQE31-LACK的全菌蛋白没有出现明显的特异表达带,而纯化蛋白和包涵体溶解物在36kDa处均出现了特异的表达带.2.36kDa的纯化蛋白被抗利什曼原虫鼠血清清晰地识别.结论得到了高效表达的LACK纯化蛋白,并有免疫原性.