华支睾吸虫cDNA文库的构建

摘要

目的构建华支睾吸虫cDNA文库.方法采集华支睾吸虫阳性鱼,分离囊蚴,感染实验动物兔,解剖兔收集华支睾吸虫成虫虫体.应用"一步法"提取华支睾吸虫总RNA;经过mRNA纯化、cDNA合成,以PcDNA3(Amp+)质粒为载体构建文库.挑取20个克隆进行扩增,选择9个克隆进行DNA序列测定.序列结果与GenBank中相关基因进行比对.结果获得含有9.7×105个重组子库容量的华支睾吸虫cDNA文库.其中PC6号克隆基因序列与华支睾吸虫半胱氨酸蛋白酶序列具有93%的同源性.结论已构建成华支睾吸虫cDNA文库.