sprE基因敲除粪肠球菌突变株的构建和功能的初步研究

摘要

目的 构建丝氨酸蛋白酶同源基因(serine protease gene,sprE)敲除粪肠球菌突变株,来研究sprE基因的功能.方法 用pTX4577质粒构建粪肠球菌sprE基因重组自杀质粒pCQ001,通过体内同源重组,筛选获得sprE基因的突变株,体外研究不同温度和氧化条件对突变株生长能力的影响.结果 经同源重组,利用卡那霉素抗性筛选,PCR、脉冲场电泳和southern blot进行鉴定获得基因突变株# sprE,突变株在40℃的生长能力以及在氧化条件下的存活率均明显降低.结论 sprE基因献除粪肠球菌突变株# sprE构建成功,为进一步研究其功能打下基础.