多房棘球绦虫elp基因核酸疫苗诱生免疫应答的实验研究

摘要

目的观察多房棘球绦虫elp基因核酸疫苗免疫BALB/c小鼠引起的体液和细胞免疫应答.方法30只BALB/c小鼠随机分成3组:Ⅰ组,肌注空质粒(pcDNA3.1)100μg/鼠;Ⅱ组,肌注多房棘球绦虫elp基因真核表达重组质粒(pcD-ELP)100μg/鼠;NS组,肌注等体积生理盐水.每2周免疫1次,共3次.ELISA方法检测免疫后不同时间产生的特异性IgG1,IgG2a和IgG 2 b水平.双抗体夹心ELISA法检测免疫鼠脾脏单个核细胞(PMNC)在受到特异抗原刺激后,产生IL-4、IL-12和IFN-γ的能力,3H-TdR掺入法检测脾淋巴细胞的增值能力.结果首次免疫后4周,Ⅱ组小鼠血清可检测到特异性IgG1、IgG2a和IgG2b抗体,随免疫时间和免疫次数的增加3种特异性抗体的OD值逐渐增高,实验结束时(首次免疫后7周)3种特异性抗体OD值均最高.Ⅰ组和Ⅱ组小鼠脾PMNC培养上清中IFN-γ浓度分别为50 pg/ml和55pg/ml,受特异抗原刺激后分别为44 Pg/ml和101.5 Pg/ml.NS组IFN-γ及各组IL-4和IL-12均未检出.Ⅰ组和Ⅱ组小鼠脾淋巴细胞增殖能力增高,其淋巴细胞CPM值分别为NS组的85倍和123倍,受到特异抗原或刀豆素刺激其淋巴细胞增殖更明显.结论多房棘球绦虫elp基因核酸疫苗可刺激BALB/c小鼠同时产生很强的细胞免疫和体液免疫应答.