多房棘球绦虫EmⅡ/3抗原编码基因在大肠杆菌和BCG中的表达

摘要

目的研究多房棘球绦虫EmⅡ/3外源基因在大肠杆菌和BCG中的表达.方法将重组质粒pBCG-EmⅡ/3转入感受态大肠杆菌Top10和用电穿孔法导入BCG构建rBCG,将含有重组子的细菌培养至对数生长期,然后45℃热诱导,分别对表达产物作SDS-PAGE及免疫印迹分析.结果多房棘球绦虫pBCG-EmⅡ/3在BCG中成功表达了EmⅡ/3重组蛋白,在相对分子量为65 kDa处可见明显的表达蛋白带,其表达量占菌体总蛋白量的9%,且能与鼠血清抗体发生特异结合,而在大肠杆菌中没有外源蛋白表达.结论多房棘球绦虫pBCG-EmⅡ/3能在BCG中表达,Western blot结果提示rBCG-EmⅡ/3表达的EmⅡ/3重组蛋白具有特异的抗原性.