提纯小管福寿螺DNA6种方法的比较研究

摘要

目的 以不同方法提纯小管福寿螺DNA, 用PCR检测以比较其效果.方法 将80只野外采集的小管福寿螺分8组,取出肺囊并剪碎后分别用QIAGEN、天根、OMEGA的基因组DNA抽提试剂盒,及异硫酸氰胍抽提法、树脂抽提法和树脂-二氧化硅抽提法提纯小管福寿螺基因组DNA,用PCR扩增福寿螺16s rDNA,测定目的 条带相对浓度以评价各方法的抽提效果.结果 各种方法提纯的基因组DNA均能用PCR扩增方法扩增出目的 条带,但目的 条带浓度有一定差异.其中,QIAGEN公司和OMEGA公司的抽提试剂盒、树脂抽提法和树脂-二氧化硅抽提法提纯的模板PCR扩增量较高,与其余4种抽提方法比较有统计学意义.试剂盒抽提法的单价成本是手工抽提法的8.4～57.1倍.结论 QIAGEN和OMEGA公司的基因组DNA抽提试剂盒的提纯效果好,但成本较高,适用于少量样本的抽提.树脂抽提法和树脂-二氧化硅抽提法从提纯效果、成本等方面评价,较适用于大量样本抽提处理工作.异硫酸氰胍抽提法,抽提快,成本低但所用试剂对身体有毒害,较适用于大量样本或应急样本的处理.