弓形虫MIC 6羧基端蛋白片段的表达及其多克隆抗体的制备

郑斌; 何蔼; 李卓雅; 郑小英; 张瑞琳; 杨潇; 詹希美

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弓形虫MIC 6羧基端蛋白片段的表达及其多克隆抗体的制备

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目的克隆表达刚地弓形虫微线体蛋白6羧基端蛋白片段(TgMIC6C),制备多克隆抗体.方法 PCR扩增目的基因片段,克隆到pGEX-4T-1载体上,构建MIC6C/pGEX-4T-1原核表达系统;IPTG诱导表达GST-MIC6C融合蛋白,亲和层析融合蛋白;用纯化的融合蛋白混合免疫佐剂免疫新西兰大白兔,制备多克隆抗体,纯化并分析抗体的特异性.结果构建了MIC6C/pGEX-4T-1原核表达系统并获得纯化的GST-MIC6C融合蛋白;获得了抗目的蛋白的多克隆抗体,抗体能特异地识别目的蛋白,抗体效价为1∶8 000.结论在体外获得了纯化的GST-MIC6C融合蛋白及其多克隆抗体,为后续GST pull-down筛选与MIC6相互作用的蛋白奠定了基础.

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来源
《中国人兽共患病学报》 |2009年第9期|870-874|共5页
作者
郑斌; 何蔼; 李卓雅; 郑小英; 张瑞琳; 杨潇; 詹希美;
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作者单位

中山大学中山医学院寄生虫学教研室,广州,510080;

新乡医学院,新乡,453000;

中山大学中山医学院寄生虫学教研室,广州,510080;

中山大学中山医学院寄生虫学教研室,广州,510080;

中山大学中山医学院寄生虫学教研室,广州,510080;

中山大学中山医学院寄生虫学教研室,广州,510080;

中山大学中山医学院寄生虫学教研室,广州,510080;

中山大学中山医学院寄生虫学教研室,广州,510080;

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正文语种 chi
中图分类弓形体;
关键词
刚地弓形虫; 微线体蛋白6; 蛋白表达; 多克隆抗体;

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