实时荧光定量PCR检测荔枝果皮中基因表达方法的建立

摘要

以不同发育阶段的'糯米糍'荔枝果皮和成熟时不同色泽表型的'糯米糍'(红色)、'乌皮荔'(紫色)和'鸭姆笼'(绿色)荔枝果皮为试材,以甘油醛-3-磷酸脱氢酶(gaodh)基因做内标、类黄酮-3-O-葡糖基转移酶(ufgt)基因为目的基因,建立了基于SYBR Green Ⅰ染料技术的Real-Time PCR检测体系,并分析ufgt基因在上述材料中的表达差异.结果表明:以cDNA为模板建立的标准曲线循环阈值(Ct)与标准cDNA模板在一定浓度范围内呈良好的线性关系,gapdh基因和ufgt基因标准曲线的相关系数分别为0.998和0.999,扩增效率分别为96.2%和95.3%.达到定量PCR分析的标准.利用该方法的分析结果表明,不同发育阶段的'糯米糍'荔枝果皮和3个成熟时不同色泽品种荔枝果皮的ufgt基因表达有显著差异.