TGF-β1基因修饰的树突状细胞对实验性自身免疫性重症肌无力大鼠外周血单个核细胞CD28/CTLA-4:B7表达的影响

摘要

目的探讨TGF-β1基因修饰的树突状细胞（DC）对实验性自身免疫性重症肌无力（EAMG）大鼠外周血单个核细胞（PBMC）CD28/CTLA-4:B7表达的影响。方法近交系8～10周龄健康雌性Lewis大鼠30只,分为正常组、EAMG组、DC对照组、pcDNA3-TGF-β1-DC组、pcDNA3-DC对照组、生理盐水对照组。除正常组外,其余各组均采用丁氏双鳍电鳐电器官乙酰胆碱受体（AChR）蛋白二次免疫的方法复制EAMG大鼠模型。初次免疫后第5天分别皮下注射2×10~6的DC、pcDNA3-TGF-β1-DC、pcDNA3-DC及等体积的生理盐水,正常组和EAMG组不接受任何治疗。初次免疫后7周分离各组PBMC,应用RT-PCR和流式细胞术方法分别进行CD28、CTLA-4mRNA及B7-1、B7-2蛋白表达水平的检测。结果（1）正常组大鼠PBMC CD28、CTLA-4 mRNA的表达水平较低,尤其CTLA-4 mRNA极少量表达;EAMG组大鼠CD28、CTLA-4 mRNA的表达水平均明显增加;pcDNA3-TGF-β1-DC组CD28 mRNA的表达较EAMG组明显降低（P＜0.01）,而CTLA-4 mRNA的表达水平较EAMG组明显增加（P＜0.05）;EAMG组、DC治疗组、pcDNA3-DC对照组和生理盐水对照组之间CD28、CTLA-4 mRNA的表达水平无显著性差异（P＞0.05）。（2）正常大鼠B7-1、B7-2在PBMC上少量表达;EAMG组B7-1、B7-2两者表达明显增加（P＜0.001）;pcDNA3-TGF-β1-DC治疗组B7-1、B7-2的表达较EAMG组均明显降低（P＜0.01）;DC对照组、pcDNA3-DC对照组、生理盐水对照组与EAMG组比较均无明显差异（P＞0.05）。结论EAMG大鼠存在PBMC CD28/CTLA-4:B7协同刺激分子的表达异常,主动调节机体的共刺激通路可能是TGF-β1基因修饰的DC治疗EAMG的机制之一。