蛋白酶体抑制剂诱导大鼠黑质变性伴包涵体形成

摘要

目的观察蛋白酶体抑制剂Lactacystin诱导大鼠黑质变性伴包涵体形成及运动行为学的改变,探讨蛋白酶体功能下降在帕金森病（PD）发病机制中的作用。方法 24只SD大鼠采用随机数字表法分为Lactacystin实验组和生理盐水组,每组12只,Lactacystin实验组将蛋白酶体抑制剂Lactacystin立体定向注射入大鼠左侧黑质致密部（SNc）,生理盐水组注射等体积生理盐水;观察大鼠自主行为和阿朴吗啡（APO）诱导的旋转行为的政变;Nissl染色法观察SNc病理改变;免疫组化法观察SNc及纹状体酪氨酸羟化酶（TH）和SNc中α-共核蛋白的表达;透射电镜观察SNc超微结构的改变。结果 Lactacystin实验组大鼠给药7d后出现自发性活动减少、动作缓慢、震颤、且症状逐步加重,APO可诱导出向健侧的旋转运动;Nissl染色发现Lactacystin实验组左侧SNc神经元数量减少,尼氏体结构松散;免疫组化结果表明21d后Lactacystin实验组左侧SNc出现变性,TH免疫阳性神经元数量减少,α-共核蛋白表达增强,纹状体内TH免疫阳性纤维数量减少;电镜观察到蛋白质聚集形成的包涵体。结论 Lactacystin单侧SNc注射可以诱导大鼠黑质变性伴包涵体形成及大鼠行为改变,蛋白酶体功能下降可能在PD发病机制中起重要作用。