miR-21调控人脑胶质瘤细胞侵袭能力的体外研究

摘要

目的探讨miR-21调控人脑胶质瘤细胞侵袭能力的体外机制。方法脂质体介导反义miR-21（AS-miR-21）转染体外常规培养的U251细胞,同时设无义寡脱氧核苷酸（ODN）组和对照组。测定荧光素酶活性验证3组细胞中miR-21的表达,Matrigel基质生长实验检测Y251细胞的生长情况,Transwell细胞体外迁移实验检测U251细胞的迁移能力,Western blotting检测细胞侵袭相关蛋白局部粘着斑激酶（FAK）、基质金属蛋白酶9/2（MMP-9/2）、人基质金属蛋白酶抑制因子1（TIMP-1）、微管蛋白α（Tubulin-α）的表达,免疫荧光检测细胞Tubulin-α蛋白的形态。结果与对照组和无义ODN组比较,转染AS-miR-21组U251细胞miR-21表达水平降低,Matrigel基质生长实验显示转染AS-miR-21组U251细胞体外培养克隆平均直径较小,Transwell细胞体外迁移实验显示转染AS-miR-21组穿膜细胞数较少,Western blotting结果显示转染AS-miR-21组Y251细胞FAK、MMP-9/2表达较低,TIMP-1表达较高,差异均有统计学意义（P＜0.05）。Tubulin-α的表达无明显变化,免疫荧光染色显示转染AS-miR-21组Tubulin-α蛋白形态扭曲。结论 miR-21高表达可以促进U251胶质瘤细胞侵袭生长,提示miR-21可以作为基因治疗脑胶质瘤的候选靶点。