HER-2/neu siRNA对人胶质瘤细胞增殖及相关基因表达的影响

摘要

目的探讨HER-2/neu特异性小干扰核糖核酸（siRNA）对高表达HER-2/neu的人胶质瘤细胞系U251MG和T98G增殖的影响及其可能机制。方法脂质体介导HER-2/neu siRNA转染体外常规培养的U251MG和T98G细胞,同时设脂质体为对照组。转染后3 d实时定量PCR和免疫印迹实验检测HER-2/neumRNA和蛋白的表达;四甲基偶氮唑盐（MTT）比色法检测转染后3、4d细胞增殖率的变化;免疫印迹实验检测转染后3 d细胞蛋白激酶B（AKT）、磷酸化AKT、磷酸化叉头转录因子（FOXO1）、p27、Cyclin D1蛋白的表达。结果与脂质体组比较,HER-2/neu siRNA组U251MG、T98G细胞转染后3 d HER-2/neu mRNA和蛋白的表达均下降,转染后3、4 d细胞增殖率均下降,转染后3 d细胞磷酸化AKT和磷酸化FOXO1水平降低、p27蛋白表达增多、Cyclin D1蛋白表达减少,差异均有统计学意义（P＜0.05）。结论 HER-2/neu siRNA转染人胶质瘤细胞系U251MG和T98G后明显抑制细胞增殖,可能与抑制AKT/FOXO1信号通路,调控下游基因p27、Cyclin D1蛋白的表达有关。