鸢尾素通过上调线粒体解偶联蛋白2表达保护脓毒症相关急性肾损伤

摘要

目的:研究鸢尾素对脓毒症相关急性肾损伤(SA-AKI)是否具有保护作用及其作用机制。方法:采用脂多糖(LPS)建立了体内和体外动物模型。用全自动生化分析仪测定血清肌酐(SCr)和血尿素氮(BUN),苏木精-伊红(HE)染色观察肾脏病理改变。利用DNA断裂的原位末端标记法(TUNEL法)检测组织细胞凋亡。免疫印迹法检测肾组织解偶联蛋白2(UCP2)、bcl-2原癌基因的编码蛋白(Bcl-2)、激活半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶3(c-caspase-3)、Bcl-2样蛋白4(Bax)、白细胞介素(IL)1β、IL-6、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、肾损伤分子1(KIM-1)、腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)、磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶(p-AMPK)和甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GAPDH)的表达。ELISA检测血清IL-1β、IL-6、TNF-α的水平。RT-qPCR检测UCP2、纤维连接蛋白Ⅲ型含结构域蛋白5(FNCD5)和p-AMPK mRNA水平。结果:体内实验,腹腔注射LPS导致小鼠肾功能受损、肾小管损伤评分水平升高,在补充鸢尾素后,能显著改善肾功能并降低损伤评分。研究发现鸢尾素显著降低肾组织和血清炎症因子(TNF-α,IL-1β和IL-6)水平,改善SA-AKI的炎症反应。分析Bcl-2、c-caspase-3、Bax的水平和TUNEL法检测结果表明,鸢尾素显著改善细胞凋亡。体外实验:测定肾近端小管上皮细胞(HK-2)内ROS水平,表明鸢尾素显著改善SA-AKI的氧化应激反应。通过体外实验研究鸢尾素与AMPK和UCP2的线性关系,发现鸢尾素可能是通过AMPK/UCP2信号转导途径上调SA-AKI中UCP2的表达从而发挥作用。结论:鸢尾素通过上调线粒体UCP2的表达在SA-AKI中发挥保护作用。鸢尾素有望成为治疗LPS相关AKI的潜在药物。