长链非编码RNA MALAT1通过PI3K/Akt信号传导通路调控肝细胞癌生物学行为的研究

摘要

目的 通过检测肝癌细胞系中长链非编码RNA MALAT1(lncRNA MALAT1)的表达情况,以及其对肝癌细胞增殖,迁移与体外成瘤能力的影响,探讨其机制.方法 采用荧光定量PCR技术(qRT-PCR)分析肝癌细胞系Huh-7,HepG2和正常肝细胞系L-O2中的lncRNA MALAT1的表达情况.将Huh-7细胞系分为MALAT1RNAi载体的细胞株Huh-7-siMALAT1组(si-MALAT1组)、转染无关干扰序列的Huh-7-NC组(si-NC组)以及空白对照组(Blank组).采用CCK-8法测定细胞的增殖能力.细胞划痕及集落形成实验测定细胞的迁移能力与体外成瘤能力.Western blot测定PI3K/Akt信号传导通路上的关键靶点PI3K及Akt蛋白的表达情况.结果 肝癌细胞系Huh-7,HepG2中的lncRNA MALAT1表达明显高于正常肝细胞系L-O2 (P＜0.05).转染MALAT1 RNAi后,Huh-7、HepG2的MALAT1表达下调(P＜0.05).CCK-8结果显示:转染48 h,si-MALAT1组与Blank组的OD450nm值分别为(0.881±0.05)与(1.151±0.06)(P＜0.05);转染72 h,si-MALAT1组与Blank组的OD450 nm值分别为(1.092±0.06)与(1.578±0.05) (P＜0.05).si-MALAT1组细胞划痕愈合率(31.420±6.235)％显著低于Blank组(63.477士4.324) ％(P＜0.05).si-MALAT1组体外成瘤能力(22.753±6.382)％明显低于Blank组(52.141±5.320)％ (P＜0.05).与Blank组相比,si-MALAT1组PI3K、Akt表达量下降(P＜0.05).结论 lncRNA MALAT1在肝癌细胞系中处于高表达状态,敲低lncRNA MALAT1可以抑制肝癌细胞的增殖,迁移及体外成瘤能力.其机制可能与lncRNA MALAT1影响PI3K/Akt信号传导通路上关键靶点的表达有关.